高通量组织研磨仪对多酚含量高的植物(木本植物)的细胞破壁
实验目的
研磨破碎多酚含量高的植物(木本植物),后续可提取其核酸或蛋白。
实验原理
充分磨碎研磨破碎多酚含量高的植物,再用相关试剂提取其总RNA。
实验材料和器具
样品:银杏叶子
www.秋葵视频:高通量组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-24)
耗材:离心管(上海净信,0.4研磨单位),研磨珠(上海净信,5号,1颗)
实验步骤
1.取0.2研磨单位的样品放入0.4体积epp管中
2.加入1-2粒5号研磨珠
3.加入0.2体积l的CTAB 抽提液
4.将加有样品的epp管放入上海净信的高通量组织研磨仪的适配器中,盖好
5.将研磨频率调到12单位振频,设定研磨时间为90秒(可根椐样品的研磨的难易程度来调节,此数据是以银杏叶子为样本得出)
6.启动研磨仪对样品进行研磨(根据不同的样品,本身性质不同,需要对研磨频率和研磨时间进行适当的调整)
实验注意事项
如果需要提取的样品比较多(比如1g),研磨好的样品在后续的提取中,需要转移到大的epp管中,研磨时可以加入较少的抽提液,研磨完毕按照1g样品2体积提取液补充抽提液,进行后续的操作。
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